Историческая справка.
В феврале 1978 г. в южных и среднезападных штатах США была зарегистрирована высококонтагиозная диарея у собак породы колли, которых выставляли на выставку. Несколько собак погибло. Позднее, с марта по май, вспышки болезни наблюдали среди собак и других пород на всей территории США. В лаборатории Корнельского университета из проб кала и кишечника больных и павших животных в культуре клеток почки собаки выделили несколько штаммов вируса с морфологическими признаками коронавируса. В августе 1978 г. новые вспышки тяжелой болезни зарегистрированы в среднезападных штатах, особенно сильные в штате Техас. Заболевание достигло 100 % у щенков до 5-месячного возраста. Падеж регистрировали и у взрослых собак. Начиная с августа 1978 г. в лаборатории университета в фекалиях больных животных с помощью электронной микроскопии был обнаружен мелкий вирус диаметром 20 нм, который по морфологическим признакам был отнесен к парвовирусу. В сентябре 1978 г. вспышка парвовирусной инфекции у собак отмечена по всей стране, особенно тяжелые случаи отмечены у собак, находившихся в питомниках . В этом же году болезнь была установлена в Австрии, Канаде, Бельгии, Нидерландах, Франции
Возбудитель
Относится к семейству парвовирусы. У собак выделено два типа. Парвовирус тип 1 (минутный вирус) был выделен в 1968 г. (Германия) из кала клинически здоровой собаки: вирус не патогенный для собак. Тип 2 изолирован в 1978 г. в США в период эпизоотии парвовирусного энтерита собак; он обладает вирулентными свойствами. Типы вируса различаются спектром чувствительности культур клеток и отсутствием перекрестной серологической реакции.
Парвовирус тип 2 — это ДНК-содержащий вирус; не имеет оболочки, обладает икосаэдрической формой; диаметр вириона (20 ± 4) нм. Вирус устойчив к физико-химическим факторам. Инфекционная активность сохраняется при воздействии на вирус эфира, хлороформа, а также при рН среды до 3. При 80 °С он инактивируется за 15 мин, при 56 °С — в течение 30 мин; при низких температурах инфекционная активность сохраняется до 2...3 лет и более. Вирус чувствителен к формалину; 0,2%-й раствор в условиях комнатной температуры вызывает полную инактивацию за 24 ч. Эффективные дезинфицирующие средства — 30 %-й раствор кальцинированной соды, жавелевой воды.
Парвовирус тип 2 обладает гемагглютинирующей активностью с эритроцитами свиньи, обезьяны макаки резус. Наилучшие условия для постановки РГА или РТГА: забуференный раствор рН 6,4...6,6, температура 4 °С.
Вирус обладает антигенным родством с вирусом панлейкопении кошек и вирусом энтерита норок. Это было установлено многими исследователями с помощью РТГА, РН и моноклональных антител. При заражении собак вирусом образуются антитела, ингибирующие гемагглютинацию и вируснейтрализующие. Антитела, ингибирующие гемагглютинацию, при внутримышечном введении вируса появляются на 2...3-й сутки после заражения, при ораназальном — через 24...48 ч. Затем титр антител повышается очень быстро и достигает максимума в РТГА на 7...8-е сутки, независимо от метода введения вируса. Серологический ответ на вирус используют при диагностике. Следует отметить, что РТГА — простой и быстрый метод, но менее чувствительный, чем РН.
Для репродукции вируса необходимое условие — это наличие активно делящихся клеток. С этой целью используют первично-трипсинизированную культуру клеток почки котенка или перевиваемую линию клеток этой же культуры (СКРК). Вирус при репродукции образует внутриядерные включения и обладает слабовыраженным ЦПД, которое под световым микроскопом нельзя обнаружить. Поэтому используют косвенные методы: выявление внутриядерных включений, МФА, ИФА, РГА.
Эпизоотология.
Парвовирусный энтерит собак впервые установлен в США и благодаря внезапности, высокой контагиозности быстро распространился по всему миру и уже к концу 1980 г. охватил почти все страны.
Основным источником распространения болезни служат фекалии больных собак (в 1 г 109 ИД50). Его также обнаруживают с низкими титрами в рвотных массах со слизью в течение 2... 12 сут, а в отдельных случаях 22 сут. Считают, что выделение вируса с калом происходит в течение 10 сут; максимального количества — на 5-е сутки. В этот момент у 50 % больных щенков в 1 г кала такое содержание вируса, которое достаточно, чтобы инфицировать 5 тыс. щенков, при условии, что доза вируса 102,5 ТЦД50 способна вызвать заболевание.
Другой, не менее важной причиной в распространении заболевания является высокая устойчивость возбудителя к физико-химическим факторам и сохранность во внешней среде до нескольких месяцев. При попадании в организм животного небольшой дозы вируса часто возникает субклиническая форма болезни; более высокая вызывает заболевание, характерное для парвовирусного энтерита . При экспериментальном заражении щенков установлено, что выделение вируса с фекалиями происходит в течение 7... 14 сут, а максимальное количество (более 109 ИД50/смЗ в 1 г кала) приходится на 4...7-е сутки после инфицирования. Вирус был обнаружен при острой стадии болезни в рвотных массах и слюне; он отсутствовал в моче. Больные собаки распространяют вирус при контакте в течение 2...3 нед.
Благодаря быстрому иммунному ответу антитела препятствуют обильному выделению вируса во внешнюю среду уже через 2 нед после заражения. Следует отметить, что вирус может длительное время сохраняться на лапах и шерсти собак и тем самым создавать угрозу для невакцинированных животных. Экспериментально зараженные собаки, не имевшие антител до начала опыта, выделяли вирус длительное время.
Передача вируса происходит также при контакте больных собак с клинически здоровыми, хотя, по мнению некоторых исследователей, этот путь представляется маловероятным. Известно, что парвовирус отличается стабильностью во внешней среде, а пероральное и интраназальное инфицирование животных довольно распространенный путь, поэтому большое значение имеет передача вируса при контакте собак с почвой, загрязненной выделениями больных животных. Передача вируса возможна также через инфицированные предметы ухода за животными, корма. Необходимо отметить, что источником вируса могут быть длительное время собаки, переболевшие парвовирусным энтеритом. Быстрому и внезапному распространению парвовирусного энтерита, особенно в начале появления заболевания, в 1978 г. способствовало интенсивное перемещение животных по странам мира. Некоторые исследователи полагают, что благодаря широкому применению биологических препаратов, таких, как гипериммунные сыворотки, гамма-глобулины и другие препараты, изготовленные из сывороток крови собак, применяемых в терапии, также явились причиной распространения заболевания в этот период.
Люди как механические распространители играют определенную роль в передаче вируса, особенно в клубах собаководства; ветеринарные врачи и их помощники способствуют этому процессу. Максимальное число случаев болезни приходится на весенне-летний период и с октября по март. Это, вероятно, связано с тем, что в это время года рождается большое количество щенков, а также происходит интенсивное перемещение животных в период отпусков, выставок. Существует неоднозначное мнение о сезонности проявления болезни. Патологоанатомы считают, по данным вскрытия трупов павших животных, что максимальная заболеваемость приходится на ноябрь—январь, а минимальная — на июнь-сентябрь. Некоторые ученые полагают, что заболеваемость в течение года не имеет сезонных колебаний.
Восприимчивость собак не зависит от породы и пола. Большинство исследователей полагают, что чувствительность к болезни зависит только от возраста: наиболее восприимчивы собаки от 2нед до 1 года. В июне 1980 г. был зарегистрирован парвовирусный энтерит енотовидных собак на 11 фермах в Финляндии. Смертность у щенков колебалась от 1 до 30 %, в то время как у взрослых животных клинические признаки болезни не наблюдали. У щенков 2...5-недельного возраста отмечали рвоту и энтерит различной тяжести; погибли 1000 щенков. При вскрытии макроскопические изменения были характерными для парвовирусного энтерита собак. Из кала был выделен парвовирус, идентичный по антигенным свойствам парвовирусу собак, обладающий гемагглютинирующей активностью с эритроцитами свиньи. При экспериментальном заражении енотовидных собак и лисиц установлена их чувствительность к вирусу. Попытка вызвать заболевание у хорьков или обнаружить антитела в сыворотке крови была безуспешной.
Установлено, что к парвовирусу собак тип 2 чувствительны и некоторые животные семейства собачьих (псовых). Заболевание было зарегистрировано у гривастого волка, павшего от гастроэнтерита в зоопарке Техаса, крабоедной лисицы, енота полоскуна, койота. Парвовирусный энтерит был также установлен в 1980 г. в зоопарке Москвы у корсаков (дикая лисица) и гибрида собаки с шакалом. В конце 1980—1982 гг. в 7 зверохозяйствах страны у лисиц и песцов был установлен парвовирусный энтерит. Клинические признаки болезни не отличались от парвовирусного энтерита собак. При исследовании проб кала от больных лисиц и песцов обнаружен гемагглютинирующий антиген с высокими титрами РГА, а в РТГА с гипериммунной сывороткой, полученной на парвовирус собак, установлено антигенное родство. С помощью электронной микроскопии в пробах кала обнаружены вирусные частицы икосаэдральной формы диаметром (20 ± 2) нм, характерные для парвовируса.
Домашние кошки, хорьки, норки также чувствительны при экспериментальном парентеральном инфицировании парвовирусом тип 2. Заболевание протекает без клинических проявлений; антитела образуются, однако при оральном введении вируса они отсутствуют в сыворотке крови животных. Предполагают, что переболевшие парвовирусным энтеритом собаки приобретают пожизненный иммунитет.
Для людей парвовирусный энтерит не представляет опасности. Так, по данным французских исследователей , при изучении сывороток крови на наличие антител к парвовирусу собак у ветеринарных специалистов с расстройством желудочно-кишечного тракта, которые имели длительный контакт с больными собаками, были получены отрицательные результаты.
Симптомы.
Симптомы болезни отличаются разнообразием. Болеют собаки всех возрастов, чувствительность не зависит от породы и пола, но наиболее восприимчивы щенки. Болезнь протекает в различных формах: в субклиническсй форме (примерно 80 %, чаще у собак старшего возраста), в умеренной (у 10 %) и в тяжелой (у оставшихся 10 %).
Болезнь преимущественно встречается в кишечной форме, реже в миокардиальной (сердечной) и в смешанной. Естественное инфицирование животных происходит ораназально. Инкубационный период составляет 4...6 сут. При экспериментальном заражении щенков ораназальным путем признаки болезни никогда не появлялись ранее чем через 3...4 суток, а при внутривенном — приблизительно через 24 ч Смертность животных колеблется от 2 до 5 % в основном у щенков.
Кишечная форма наиболее часто встречается у щенков в возрасте 2...6 мес. Первые клинические признаки появляются внезапно; вначале потеря аппетита, живот иногда становится напряженным и чувствительным при пальпации, быстро появляется рвота и в большинстве случаев затрудняется мочеиспускание. Рвотные массы часто с примесью слизи и желчи. Примерно через 24 ч после нее появляется диарея. Кал может быть желтого, зеленого, ярко-фиолетового, темно-красного цвета, жидкой консистенции, геморрагичным или со значительным количеством крови (иногда она отсутствует. Фекалии обладают зловонным запахом. Температура тела в большинстве случаев в пределах нормы или незначительно повышается в первые дни болезни на 0,5...0,8 °С и в редких случаях на 1...2°С. Некоторые исследователи считают, что повышение температуры указывает на неблагоприятный исход. Лейкопения отмечается у 25...30 % собак в первые 4...5 сут болезни и совпадает с повышением температуры тела: число лейкоцитов может снизиться до 500...2000 в 1 мм3.
Рвота и диарея быстро приводят к обезвоживанию организма животного. Признаки обезвоживания часто проявляются в складчатости кожи и западении глазного яблока. В ротовой полости молодых щенят можно обнаружить везикулы, которые постепенно исчезают, но этот признак встречается очень редко. У собак более старшего возраста заболевание может протекать в субклинической форме в течение 2...3 нед и более. У них отмечают резкое снижение аппетита, угнетение, редко расстройство желудочно-кишечного тракта.
На течение болезни могут влиять сроки отъема щенят от матерей, наличие гельминтов, лямблий, стрессы, состояние иммунной системы, а также вирулентность и доза вируса, проникшего в организм.
У собак, переболевших парвовирусным энтеритом, осложнения и какие-либо последствия не отмечены, хотя у некоторых щенков возможна некоторая задержка в росте. У переболевших животных создается иммунитет У инфицированных беременных сук отмечены аборты, рождение мертвых щенков или щенков с аномалиями (гипоплазия головного мозга, персистенция небной щели, носа, губ); у зараженных кобелей — полное отсутствие спермы (аспермия) или гипоспермия.
Сердечная (миокардиальная) форма болезни встречается значительно реже, чем кишечная, у щенков в возрасте от 3 нед до 2 мес, которые не имеют пассивных или активных антител. Однако чаще ее регистрируют до 4-недельного возраста. Внезапная гибель совершенно здоровых щенков сопровождается затрудненным дыханием, тахикардией, слабым пульсом, посинением слизистых оболочек, конвульсией и коллапсом. Обычно более 50 % щенков в 8-недельном возрасте погибает от острой сердечной недостаточности, а у выживших остаются поражения миокарда.
Подострая сердечная недостаточность у щенков старше 8 нед сопровождается одышкой, депрессией, слабостью, прострацией, застойными явлениями в печени. В результате может развиться асцит, аритмическая тахикардия. Эта форма болезни может продолжаться в течение нескольких месяцев; сердечная недостаточность приводит к поражению легких.
Диагноз
Диагностика.
Предварительный диагноз может быть поставлен на основании эпизоотологических данных, клинических признаков и патологоанатомических изменений. Клиническая диагностика у щенков в возрасте от 8 до 12 нед не представляет особых трудностей, так как у молодых животных, особенно родившихся от собак, невакцинированных против парвовирусного энтерита, симптомы характерны для заболевания: внезапность появления, наличие рвоты, геморрагический энтерит, обезвоживание организма, а иногда лейкопения. Следует отметить, что лейкопению наблюдают примерно у 50 % животных и по ней нельзя с уверенностью идентифицировать заболевание. Из патологоанатомических изменений характерные признаки чаще всего наблюдают в тонком отделе кишечника в виде острого катарального геморрагического воспаления. Мезентери-альные лимфоузлы почти всегда бывают увеличенными: отечными и геморрагичными. Собакам более старшего возраста по клиническим признакам поставить предварительный диагноз довольно трудно; окончательный диагноз устанавливают лабораторными методами.
Возбудитель можно обнаружить в кале больных собак, взятом в течение острого периода болезни. Для обнаружения антигена вируса применяют реакцию гемагглютинации (РГА). При положительных результатах проводят идентификацию обнаруженного возбудителя в реакции торможения гемагглютинации (РТГА) с использованием моноспецифической сыворотки. РТГА обладает высокой чувствительностью, достоверностью и превосходит многие другие. Преимущество этого метода заключается не только в его достоверности, он прост при постановке и не требует дорогостоящих реактивов и оборудования. С помощью РТГА в августе 1980 г. впервые в нашей стране был установлен парвовирусный энтерит собак.
Наряду с этим методом при диагностике и для обнаружения вируса в фекалиях применяют вирусологический. Для выделения вируса из кала используют первично-трипсинизированные или перевиваемые линии культуры клеток почки котенка: осуществляют 2...3 последовательных пассажа. Обнаружение вируса в последнем пассаже подтверждают в РГА и РТГА. Несмотря на то что с помощью этого метода были достигнуты положительные результаты, он не получил практического применения в диагностике из-за длительности получения результатов и высокой стоимости.
Гистологические исследования применяют при посмертной диагностике. От павших животных не позже чем через 2 ч берут фрагменты тонкого отдела кишечника, селезенки, тимуса и мезентериальных лимфоузлов, которые фиксируют в жидкости Буэ-на. В тонком отделе кишечника наблюдают некроз эпителиальных клеток крипт, уменьшение числа лимфоцитов в органах лимфоидной ткани. Внутриядерные включения могут быть обнаружены в тонком отделе кишечника.
Используют также иммуноферментный анализ (ИФА). Этот метод наиболее чувствителен при исследовании пат-материала. В нашей стране НПО «Нарвак» выпускает набор Пар-вотест для экспресс-диагностики парвовирусных инфекций плотоядных для выявления антигена парвовирусного энтерита собак, панлейкопении кошек, вирусного энтерита норок в фекалиях инфицированных животных. Высокой чувствительностью обладает и ПЦР с праймерами (фрагменты генов капсульных белков VI и V2). Полагают, что этот метод позволяет дифференцировать вирулентные штаммы вируса от вакцинных.
Для диагностики заболевания используют электронную микроскопию. Материалом для исследований служит кал от больных собак, взятый в период развития клинических признаков. Этот метод применяют в исключительных случаях, так как он требует дорогостоящего оборудования и специальной подготовки исследователя.
При диагностике болезни могут быть применены серологические методы. Установлено, что у больных собак антитела образуются через 5...7 сут после инфицирования с высокими тиграми в РТГА (1 : 512 и выше 1 : 8192); снижение происходит через несколько недель и удерживается на умеренном уровне в течение года. Для обнаружения антител используют РТГА и реакцию нейтрализации (РН) в культуре клеток почки котенка. РН более чувствительна, чем РТГА, но дорогостоящая, и ее постановка занимает много времени (примерно неделю). Сыворотки крови исследуют дважды с интервалом 24...48 ч.
Дифференциальная диагностика — существенный момент в исследовании, так как энтериты у собак бывают различной этиологии: алиментарный, токсический, паразитарный, бактерийный, вирусный. Диареи алиментарного происхождения встречаются спорадически, довольно редко сопровождаются рвотой и имеют благоприятный исход. Алиментарный гастроэнтерит наблюдается также и при остром панкреатите у сук среднего возраста, страдающих ожирением.
Гастроэнтерит геморрагический неинфекционного происхождения, или кишечный геморрагический синдром, отмечают чаще у карликовых пород, и особенно у шнауцеров. При этом внезапно появляются рвота, зловонная диарея с кровью. Причина болезни изучена недостаточно, она, возможно, связана с аллергией или анафилаксией (бактерийный эндотоксин).
Гастроэнтерит может быть вследствие интоксикации различными веществами (аспирин, нафталин, мышьяк, органический фосфор, свинец, уксус и др.); в большинстве случаев интоксиканты обусловливают абдоминальный маркированный запах. Как правило, наряду с энтеритом и рвотой они приводят к конвульсиям или другим нервным расстройствам.
Гастроэнтерит паразитарного происхождения вызывают цестоды, аскариды, нематоды, анкилостомы, стронгилы, кокцидии, лямблии. Проявляется внезапно, без угнетения общего состояния организма, но отягощает клиническое течение парвовирусного энтерита собак, и особенно щенков.
Среди бактериальных инфекций наиболее часто встречается колибактериоз у щенков; кал становится жидким, продолжительность болезни несколько дней. Сальмонеллез у собак встречается довольно редко, даже если они являются носителями возбудителя; болеет молодняк, но очень редко отмечают гибель животных. У собак известен спирохетозный энтерит; спирохету обнаруживают в содержимом кишечника.
Из энтеритов вирусного происхождения большое значение в дифференциальной диагностике имеет коронавирусный энтерит собак. По клиническим признакам болезнь сходна с парвовирусным энтеритом собак (см. приложения). Болеют собаки всех возрастов, но чаще щенки. Инкубационный период 1...4 сут. Рвота предшествует диарее, а иногда возникает одновременно с ней; обычно через 1...2 сут она прекращается. Кал становится разжиженным, зловонным, желтовато-зеленого цвета с примесью слизи, а иногда и крови. Происходит обезвоживание организма. Температура тела повышается очень редко, субфебрильная.
При дифференциальной диагностике следует исключить инфекционный гепатит, который у молодых щенков по некоторым клиническим признакам сходен с аденовирусом. Наблюдается повышение температуры тела до 40...41 °С, а у отдельных щенков — диарея с кровью. Среди диарей вирусного происхождения в дифференциальной диагностике заслуживает внимания диарея, вызванная ротавирусом собак. Ее отмечают у щенков в течение первых недель жизни. Испражнения становятся жидкими со слизью и очень редко с незначительным количеством крови.
Необходимо также дифференцировать кишечную непроходимость ( инородное тело и инвагинацию). При подозрении на эти патологии, животному проводится рентген с контрастным веществом.
Лечение.
Необходимо осуществлять комплексное индивидуальное лечение.
Очень важно помнить о контроле за состоянием животного в течении болезни. Необходимо каждые три дня проводить общий анализ крови животного, и каждые четыре дня контролировать биохимические показатели.
Для контроля сердечной деятельности проводится ЭКГ, для исследования состояния поджелудочной железы, печени, селезенки и почек, проводится УЗИ.
Из специфических средств используют поливалентную сыворотку против чумы плотоядных, парвовирусного, коронавирусного энтеритов и аденовирусных инфекций собак (Гискан-5) и поливалентный иммуноглобулин (Глобакан), которые выпускает НПО «Нарвак». Препараты рекомендуется вводить в начальной стадии болезни в течение 1...3 сут в соответствии с инструкцией.
Регидратация и дезинтоксикация – главное.
Восполнение потери воды и жизненно необходимых ионов и микроэлементов, обязательное условие в лечении энтерита.
Для этой цели применяют внутривенные инфузии водно-солевых растворов – физиологический раствор, трисоль, хлосоль, 5% глюкоза. А также очень хорошо зарекомендовали себя растворы – мафусол и дюфалайт.
Необходимо применение инфузионных растворов для снятия интоксикации, таких как реополиглюкин и желатиноль. Инфузии желательно проводить два раза в сутки.
Параиммунизация — применение неспецифических антигенов. Для этого используют иммуномодуляторы: ликопид, полиоксидоний, риботан.
Иммуномодуляторы нового поколения – глутоксим, галавит.
Симптоматическая терапия.
Комплекс мероприятий, направленных на остановку рвоты и поноса (в том числе кровавого), снятия боли и спазма кишечника. Используются спазмолитики- но-шпа, папаверин, дюспаталин, баралгин; противорвотные препараты – мотилиум, латран, церукал, кровеостанавливающие препараты – дицинон, викасол. В тяжелых случаях, для остановки кишечного кровотечения, используется препарат - транексам.
Для предотвращения обсеменения вторичной микрофлорой, применяются антибиотики. При тяжести процесса, используются цефалоспорины четвертого поколения (максипим), карбопенемы, у взрослых животных можно использовать фторхинолоны в виде внутривенных инфузий. Не лишним будет также внутривенное введение противопротозойного и антибактериального препарата – метронидазол.
Необходимо помнить, что у животных с данной патологией, развивается реактивный панкреатит, поэтому на всем протяжении лечения нужно применять противопанкреатические препараты (контрикал), при выраженном панкреатите – октреотид.
Сердечная терапия – сульфокамфокаин, рибоксин, кокорбоксилаза, мелдронат, применяются с первого дня лечения. При выраженной сердечной патологии возможно внутривенное применение коргликона и строфантина.
Витаминная терапия – применение витаминов группы В, аскорбиновой кислоты в высоких дозах. Аскорбиновая кислота необходима при инфекционных болезнях, так как при них её количество в организме сильно снижается. Этот витамин существенно влияет на выработку антител в организме.
Внутрь, если прекратилась рвота, можно выпаивать небольшие порции растворов регидрон и энтеродез, а также раствор ромашки.
Если данная терапия не приносит ожидаемых результатов, то можно прибегнуть к переливанию крови, желательно от родственного животного или животного данной породы.
Эта процедура дает очень неплохие результаты в самых тяжелых случаях.
Кормление.
После появления аппетита, собак выдерживают на голодной диете еще в течение 12 -24 часов и затем назначают диетотерапию. Ветеринарная диетотерапия, или лечебное кормление — метод лечения животных, заключающийся в применении специальных рационов и режимов кормления направленных на восполнение недостающих организму питательных и биологически активных веществ. Заместительная диетотерапия предусматривает сбалансированное кормление животных, максимально щадящий режим для слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта, включение в рацион натуральных диетических легкоусвояемых продуктов, а также 4-5-кратный прием корма небольшими порциями.
Иммунитет.
У взрослых собак формируется в основном напряженный длительный иммунитет.
Профилактика.
Для активной иммунопрофилактики парвовирусного энтерита широко используют отечественные и зарубежные вакцины, такие как Дюрамун, Нобивак, Гексадог, Эурикан и др.