4 ВИРУСНАЯ ЛЕЙКЕМИЯ КОШЕК
ЭТИОЛОГИЯ
- Возбудителем болезни является ретровирус С-типа из подсемейства онкорнавирусов.
- Три варианта вируса — А, В и С — выделяют серологическим и генетическим анализом. Только ВЛК-А специфичен для кошек.
ВЛК-В, который был найден у кошек, инфицированных ВЛК-А, является результатом рекомбинации вируса типа А и эндогенного ВЛК. ВЛК-С является крайне распространенным вариантом вируса, который также находят у кошек, инфицированных ВЛК-А. Штаммы ВЛК-С являются мутацией ВЛК-А.
Патогенез ВЛК-инфекции
- Главными воротами инфекции является пищеварительный тракт, хотя возможна и трансплацентарная передача инфекции.
- Вирус обнаруживают в слюне, моче, кале и молоке, поэтому тесные контакты и взаимное вылизывание имеют главное значение в распространении инфекции.
Репликация ВЛК происходит в носоглотке, особенно в миндалинах, из которых он распространяется в другие лимфоидные ткани, главным образом в костный мозг. Многие кошки дают иммунную реакцию, благодаря которой вирус элиминируется на этой стадии, хотя может оставаться в латентной форме в костном мозге.
Более интенсивная репликация вируса в костном мозге может давать начало виремии и распространению инфекции, особенно в лимфоидные ткани и эпителиальные клетки носоглотки, слюнные железы и верхние дыхательные пути с последующим выделением вируса и заражением других кошек. На этой стадии эффективный иммунный ответ может элиминировать активную инфекцию, давая начало временной виремии, которая продолжается от 2 дней до 8 недель.
Однако некоторые кошки не элиминируют вирус, у них развивается персистирующая инфекция. У этих животных проявляются клинические симптомы, и они становятся источником инфекции для других кошек.
Распространение и клинические проявления инфекции тесно связаны с возрастом, иммунитетом и заражающей дозой вируса.
- Восприимчивость котят к инфекции явно снижается с возрастом, и, таким образом, персистирующая инфекция развивается только у одного из пяти котят старше 16 недель.
- Вируснейтрализующие антитела, которые содержаться в молозиве, защищают котят в первые 4 недели жизни.
- Заражающая доза вируса зависит от окружающей обстановки.
- У кошек индивидуального содержания контакты с восприимчивыми и выделяющими вирус животными редки, поэтому заражающая доза будет мала. Хотя большинство кошек может заразиться, но персистирующая инфекция разовьется лишь у некоторых из них.
- В больших кошачьих сообществах степень контактов и риск последующего заражения очень высоки, в таких условиях у 30% котят может развиться персистирующая инфекция.
- Персистирующая инфекция у кошки-матери приводит к развитию персистирующей инфекции у всех котят данного помета.
Латентная инфекция
Более половины кошек, которые выздоровели после ВЛК-инфекции, носят латентную инфекцию в костном мозге. Выброс вируса при латентной инфекции слишком низок для определения или для заражения эпителиальных клеток, и в дальнейшем, латентно инфицированные кошки редко являются источником инфекции для других животных. Однако латентный вирус активирован к репликации кортикостероидами. Даже латентный вирус в конце концов элиминируется, но примерно 10% кошек остаются латентно инфицированными по крайней мере на три года.
КЛИНИЧЕСКИЕ СИМПТОМЫ
ВЛК-инфекция, наверное, самая распространенная причина смерти молодых взрослых кошек.
Клиническое заболевание наблюдается у хронически инфицированных кошек, большинство из которых умирает в течение 4 лет после заражения этим вирусом. Клинические синдромы, вызываемые с ВЛК-инфекцией, связаны с поражением кроветворной системы. Инфекция костного мозга оказывает серьезное воздействие на развитие лимфоидных и миелоидных клеток, давая начало их пролиферации (неоплазии) или подавляя их рост, хотя первичный механизм патогенеза неизвестен. Также следует отметить, что ВЛК-инфекция часто бывает связана с нарушением воспроизводства.
Неоплазия
ВЛК-инфекция может вызывать неоплазию лимфоидной и миелоид-ной ткани, хотя наиболее распространенным злокачественным новообразованием кроветворной системы у кошек является лимфосаркома (90% всех опухолей кроветворных органов и около трети всех неоплазии у кошек). Большинство случаев возникновения лимфосаркомы у кошек связано с ВЛК-инфекцией.
Лимфосаркомы подразделяются на четыре основных вида.
Тимусная (передняя медиасгинальиая) лимфосаркома
- Встречается главным образом среди молодых кошек (в возрасте младше 3 лет).
- Т-клетки в тимусе +/- локальные лимфоузлы, редко в крови.
- Симптомы включают тахипноэ, диспноэ, регургитацию и потерю веса.
- Часто присутствие плеврального выпота (заглушенные сердечные шумы), содержащего неопластические клетки (цитология ас-пиратов).
- При пальпации — повышенное напряжение грудной клетки.
- Диагноз ставится по результатам рентгенографии, цитологического анализа плеврального выпота, биопсии опухоли, которые на 80% ВЛК-положительны.
Многоочаговая лимфосаркома
- Периферическая макроскопическая лимфоаденопатия и увеличенная селезенка.
- Часто легкая анемия.
- Средний возраст 4 года.
- Диагноз ставится на основании результатов биопсии, которые на 60% ВЛК-положительные.
Абдоминальная лимфосаркома
- Опухоли в брюшной полости (главным образом между двенадцатиперстной и ободочной кишками, реже желудком или прямой кишкой), иногда диффузные.
- Иногда бывают затронуты локальные лимфоузлы и почки.
- Анорексия, потеря веса, рвота при сильной непроходимости, иногда понос и чаще анемия. - Средний возраст 8 лет.
- Диагноз ставится на основании клинических симптомов, пальпации брюшной полости, рентгенографии, лапаротомии. Только 30% ВЛК-положительные.
Лимфоидная лейкемия
- Базируется в костном мозге и поражает кроветворную систему.
- В дальнейшем сдвиг лейкоцитарной формулы крови, анемия и часто тромбоцитопения (с точечными кровотечениями на коже и слизистой оболочке).
- Лихорадка, слабость, потеря аппетита.
- Часто увеличена селезенка, редко — лимфоузлы.
- Диагноз основан на исследовании крови (неопластические клетки в мазках), биопсии костного мозга/аспиратов, результаты ВЛК-положительны в 60% случаев.
Лимфосаркомы часто развиваются в почках, носу, глазах, ЦНС и коже.
ВЛК-серонегативная лимфосаркома
ВЛК-серонегативная лимфосаркома не связана с ВЛК, это может быть, например, первичная неоплазия или результат ВИК-инфекции у старых кошек. Однако ВЛК-серонегативные случаи возникновения лимфосаркомы более распространены в колониях кошек с энзоотической ВЛК-инфекцией. Возможно, это происходит потому, что кошки с хорошей иммунной реакцией элиминируют вирус, но только после трансформации части клеток.
Миелоидная лейкемия
Миелоидная лейкемия встречается редко. Могут быть затронуты гранулоциты и эритроциты. В первую очередь повреждается костный мозг с возможным вторичным повреждением печени, селезенки и лимфоузлов. Наблюдается прогрессирующая анемия, перемежающаяся лихорадка и потеря веса. Тромбоцитопения вызывает точечные кровотечения, а лейкопения — иммуносупрессию и развитие вторичных инфекций. Диагноз ставится по результатам биопсии и исследованию крови. Почти всегда они бывают ВЛК-положительные, но эозинофильная лейкемия обычно дает ВЛК-серонегативный результат.
Анемия
Анемия относительно распространена у кошек по сравнению с другими видами животных, а ВЛК-инфекция является, возможно, самой важной причиной этого заболевания. Анемия может быть первична либо является результатом лимфоидной или миелоидной лейкемии, затрагивающей процесс нормального кроветворения. Первичная аплазия эритроцитов вызывает быстрое развитие анемии. Гематокрит может падать ниже 10%, хотя количество лимфоцитов остается нормальным. В связи с тем, что анемия является неренегеративным заболеванием, эритроциты остаются нормоцитозны и нормохромны.
Легкая, а чаще средняя форма гемолитической анемии также распространена у кошек, инфицированных ВЛК.
Полная костная аплазия встречается редко. У пораженных кошек наблюдается сильная лейкопения и анемия с быстрой потерей веса, анорексией и лихорадкой. При вскрытии выясняется, что у этих кошек был геморрагический энтерит и геморрагичные мезентериальные лимфоузлы.
Иммуносупрессия
Механизм, лежащий в основе иммуносупрессии, вызванной ВЛК, сложен и мало изучен. Важен штамм вируса, также играет роль структура белка оболочки р15Е, который может подавлять лимфоцитарный рост in vitro. Иммунодефицитные кошки обычно восприимчивы ко вторичным инфекциям, а клинические симптомы, связанные с иммуносупрессией варьируют в широких пределах.
- Кошки с персистирующей ВЛК-инфекцией очень восприимчивы к вирусным, бактериальным и грибковым респираторным и кишечным инфекциям и энтеритам. Такие кошки обычно очень худы и хронически больны или лихорадят.
- Иммуносупрессия может быть связана с гингивитами и стоматитами, хотя у старых кошек этот синдром чаще всего связан с ВИК.
- Заражение Haemobartonella и анемия более вероятны у кошек, инфицированных ВЛК, чем у здоровых кошек.
- Возникновение клинического инфекционного перитонита более распространено в кошачьих колониях, зараженных ВЛК.
- Персистирующие абсцессы или затяжное выздоровление у молодых кошек объясняются иммуносупрессией, вызванной ВЛК.
- Также наблюдали связанные с ВЛК-инфекцией "панлейкопения-подобные" энтериты, хотя считается, что их вызывает неизвестная парвовирусная инфекция.
Нарушения репродуктивной функции
- ВЛК-инфекция является наиболее распространенной причиной возникновения репродуктивной недостаточности у кошек.
- Резорбция плода обычно происходит на 3-5-й неделе беременности, поэтому беременность может быть подтверждена пальпацией небольших плодных припухлостей.
- Резорбция плода сопровождается выделениями из вульвы.
- Пораженные кошки-матери обычно имеют нормальную предшествующую беременность.
- Механизм смерти плода неизвестен, но может вызывать воспаление плаценты и эндометрит.
- Если плод выжил, и котенок родился вовремя, то он обычно уже инфицирован и очень слаб: ВЛК является возможной причиной синдрома "увядания" котят.
ЛЕЧЕНИЕ
Лечение ВЛК-обусловленных анемий, иммуносупрессии и репродуктивной недостаточности включает только неспецифическую интенсивную терапию и имеет очень неблагоприятный прогноз.
Небольшие успехи отмечаются и при лечении как миелоидной, так и лимфатической лейкемии. При лечении тимусной и многоочаговой лимфосарком уровень ремиссии превышает 60%, хотя кошки с этими заболеваниями обычно инфицированы ВЛК и в дальнейшем у них развиваются другие ВЛК-обусловленные заболевания, и они являются источником инфекции для других кошек.
Применяются различные типы лечения, использующие комбинации цитотоксических препаратов и кортикостероидов. Однако, в связи с тем, что правильная дозировка и назначение этих лекарственных средств является ключевым моментом, а сама схема лечения очень сложна, перед назначением химиотерапии больную кошку необходимо показать специалистам.
ДИАГНОСТИКА
Несколько компаний выпускают иммуноферментный анализ и другие тестсистемы для проверки цельной крови, сыворотки, плазмы или слюны на присутствие ВЛК-антигенов. Наличие инфекции подтверждается выделением вируса или иммунофлюоресценцией. Если антиген присутствует в кровеносной системе, а вирус уже элиминирован из крови, то некоторые кошки дают положительную реакцию после анализа ЭЛАЙЗА, но от них не удается выделить вирус. Следует отметить, что ЭЛАЙЗА может давать ложноположительные результаты, если образцы сыворотки гемолизированы. Для определения статуса виремии (острая или хроническая) кошку необходимо вновь протестировать через 12 недель.
КОНТРОЛЬ РАСПРОСТРАНЕНИЯ ИНФЕКЦИИ
Проверка и удаление инфицированных кошек
Обычная проверка и последующее удаление всех ВЛК-инфицированных кошек помогает исключить распространение инфекции во многих кошачьих сообществах. Методика достаточно проста и относительно дешева.
- Проверять всех кошек, отделять ВЛК-положительных животных от ВЛК-отрицательных, не принимать новых кошек и дезинфицировать помещения и т.д.
- Перепроверка через 12 недель и изоляция ВЛК-положительных животных (усыпление или перемещение).
- Проверка всех кошек каждые 6-12 месяцев.
- Проверка и изоляция в течение 12 недель всех вновь поступивших животных.
Вакцинация
Применяется несколько синтетических и инактивированных вакцин. Опубликованные данные свидетельствуют, что при большинстве экспериментальных заражений вакцины показали себя достаточно безопасными и эффективными.
- Рекомендуется проводить вакцинацию кошек начиная с возраста 9 недель.
- Некоторые ветеринары рекомендуют проводить обычное тестирование на ВЛК-антигены перед вакцинацией, потому что вакцина не обладает лечебным эффектом. Однако имеет смысл взвесить необходимость этой проверки и риск прорыва иммунитета после вакцинации.
- Вакцинация не вызывает антигенемии и в дальнейшем не влияет на обычный ВЛК-анализ. Таким образом, нахождение у привитой кошки ВЛК-виремии или антигенемии не является результатом вакцинации, а говорит о присутствии естественной инфекции.
- В связи с тем, что вакцина неживая, иммунитет после вакцинации не пожизненный, поэтому рекомендуется ежегодная ревакцинация. В то время, как большинство кошек старше 5 лет уже встретились с естественной ВЛК-инфекцией и приобрели достаточный иммунитет, вопрос о ревакцинации старых кошек должен рассматриваться индивидуально.
- Хотя ВЛК-вакцинация широко применяется среди кошек домашнего содержания, но наибольшую пользу она может принести в питомниках разведения кошек, где ВЛК-инфекция обычно является потенциальной проблемой.
- В таких ситуациях вакцинация всех кошек и особенно маленьких котят помогает предотвращать и контролировать любые прорывы иммунитета без обычной проверки животных и риска какой-либо поствакцинальной инфекции.
- Как и большинство других вакцин, ВЛК-вакцина не может обеспечить 100%-защиту, она должна быть дополнением к обязательной схеме "проверка и удаление инфицированных кошек".
- Обязательно нужно помнить, что вакцинация не гарантирует того, что кошка будет свободна от ВЛК. В дальнейшем она может стать источником инфекции для других кошек.
ВИРУСНАЯ САРКОМА КОШЕК
Вирус саркомы кошек (ВСК) является результатом взаимодействия ВЛК с частью генома клетки-хозяина вируса. Это приводит к формированию рекомбинантного вируса, который имеет делеции, не позволяющие ему реплицироваться без помощи первоначального ВЛК, но он содержит клеточный онкоген и способен вызывать опухоли, главным образом в фибробластах.
Случаи заражения ВСК отмечались по всему миру, но достаточно редко. ВСК-опухоли наблюдались у кошек с персистирующей ВЛК-инфекцией. Только при экспериментальном заражении клетки опухоли содержали ВСК и ВЛК, но в естественных условиях при обычных контактах кошки с кошкой такой передачи инфекции не наблюдается. ВСК находят во всех клетках опухоли, но у пораженных кошек был выделен только естественный тип ВЛК.
Опухоли обычно проявляются в виде множественных язвенных или узловатых незаживающих поражений кожи, которые вновь образуются после хирургического удаления. Позже возникают метастазы во внутренних органах. Все пораженные кошки имеют ВЛК-антигены в крови. В противоположность спонтанной фибросаркоме, которая обычно наблюдается в виде единичных опухолей у старых кошек, большинство ВСК-обусловленных опухолей возникают у кошек в возрасте 1-7 лет.
Диагноз обычно основан на анамнезе, выделении ВЛК и гистологическом подтверждении фибросаркомы, хотя для уточнения диагноза требуется тщательное лабораторное исследование.
5 ВИРУСНЫЙ ИММУНОДЕФИЦИТ КОШЕК
ЭТИОЛОГИЯ
Вирус иммунодефицита кошек (ВИК) является лентивирусом из семейства ретровирусов. Структурно, биохимически и по своей нуклеотидной последовательности он родственен вирусу иммунодефицита неловка (ВИЧ), причины СПИДа у людей, а инфекция у кошек, обусловленная этим вирусом, по своим клиническим проявлениям также связана с развитием иммунодефицита. ВИК не инфицирует человеческие клетки, а многочисленные исследования показали, что у человека не наблюдается никакой инфекции, обусловленной ВИК.
ЭПИЗООТОЛОГИЯ
- ВИК был выявлен у домашних кошек по всему миру.
- ВИК был выделен у большинства кошек, имеющих положительную реакцию на антитела.
- Антитела к ВИК-подобным вирусам были выявлены у других представителей семейства кошачьих как в дикой природе, так и в зоопарках, хотя у других кошачьих выделено несколько штаммов этого вируса.
- Титры антител у домашних кошек варьируют в зависимости от возраста и образа жизни, от 20% у "ослабленных" кошек до 5% у здоровых.
- Эта инфекция чаще обнаруживается у котов, чем у кошек, и основной возраст заболевания — более 5 лет.
- ВИК-инфекция наиболее распространена у кошек уличного содержания, у диких кошек и в колониях с постоянно сменяющимися членами. Антитела присутствуют примерно у трети кошек, контактировавших с инфицированной кошкой.
Основным путем передачи инфекции считаются взаимные укусы. Высокая концентрация вируса отмечена в слюне, а передача инфекции при укусах подтверждена экспериментально. Также экспериментально продемонстрировано трансплацентарное заражение плода, хотя встречались отдельные случаи горизонтального распространения инфекции от матери к котятам через слюну и молоко.
- Теория о передаче инфекции посредством укусов соответствует эпизоотологии ВИК-инфекции: группу риска составляют взрослые коты свободного (уличного) содержания, либо находящиеся в нестабильных по составу кошачьих сообществах.
- Питомники разведения породистых кошек обычно более стабильны по составу, там меньше драк между животными и соответственно меньше инфекции.
КЛИНИЧЕСКИЕ СИМПТОМЫ
Экспериментальная инокуляция котят ВИК и лимфоаденопатией иногда сопровождалась легкой лихорадкой, депрессией и лейкопенией, развившихся примерно через 4 недели. Эта лимфоаденопатия менее выражена у более взрослых кошек, но обычно отсутствует у кошек, инфицированных естественным путем. Лимфоаденопатия постепенно исчезала в течение нескольких недель или месяцев.
Затем инфицированные кошки оставались клинически здоровыми в течение нескольких лет, пока не проявлялись ВИК-обусловленные симптомы. Возможно, что многие кошки умирали от других причин еще до развития СПИД-подобного заболевания.
- Клиническое заболевание наблюдается главным образом в среднем возрасте или у старых кошек.
- Как СПИД у людей, ВИК-инфекция часто вызывает клинические симптомы, напрямую не связанные с ВИК. Обычно это вторичные инфекции, обусловленные микроорганизмами, которые у иммунокомпетентных кошек вызывают только легкое заболевание.
Клинический синдром, обусловленный ВИК-инфекцией, обычно проявляется в виде:
- Хронический стоматит и хронический гингивит.
- Хронические заболевания верхних дыхательных путей.
- Истощение.
- Лихорадка.
- Лимфоаденопатия.
- Анемия.
- Хронические кожные заболевания.
- Хронический понос.
- Неврологические симптомы.
- Считается, что неврологические заболевания вызывает прямая ВИК-инфекция ЦНС. ВИК-обусловленные неврологические заболевания проявляются в виде двигательных и сенсорных нарушений или поведенческих изменений, включая аномалии сна. Таким образом, клинические симптомы показывают, какая часть ЦНС поражена ВИК-инфекцией.
- Заболевания глаз нередки у ВИК-инфицированных кошек. При диагностике глазных болезней, связанных с ВИК-инфекцией, может потребоваться офтальмологическое обследование, причем эти болезни обычно не связаны с потерей зрения. Передний увеит и глаукома описаны у ВИК-инфицированных кошек. Считается, что идиопатический увеит, наблюдаемый у кошек старше 6 лет, может быть ВИК-обусловленным.
- Имеется несколько свидетельств о том, что ВИК-инфекция может быть связана с повышенным риском неоплазии.
- Клинические симптомы ВИК-инфекции часто связаны с вторичными инфекциями:
- Большинство ВИК-инфицированных кошек обычно имеют хронический стоматит и персистируюшую калицивирусную (КВК) инфекцию в носоглотке. Хотя неизвестно, играет ли КВК-инфекция главную роль в этих заболеваниях, или у иммуносупрессивных кошек происходит активация КВК.
- Кошки с хроническими заболеваниями верхних дыхательных путей часто инфицированы КВК или герпесвирусами. При поражении оральных и хронических респираторных заболеваниях и бактериальная инфекция играет значительную роль, поэтому назначение антибиотиков позволяет сильно уменьшить, но не исключить клинические симптомы. Тяжелая системная герпетическая инфекция также отмечалась у ВИК-инфицированных кошек.
- Тяжелые системные поксвирусные инфекции отмечали у ВИК-инфицированных кошек.
- Активный токсоплазмоз чаще обнаруживают у ВИК-инфицированных, чем у неинфицированных кошек, а ВИК-обусловленная иммуносупрессия может быть связана с клиническими проявлениями токсоплазмоза у кошек.
- Хронические кожные болезни у ВИК-инфицированных кошек могут быть связаны с паразитами, такими как клещи Notoedres, Cheyletiellaи Demodex, а также с различными грибковыми и бактериальными инфекциями.
- Другими оппортунистическими и вторичными инфекциями, связанными с ВИК, являются гемобартонеллез, кишечный кокцидиоз, кандидоз, аспергиллез, криптококкоз, псевдомонадные и микобактериальные инфекции.
- Инфекции, обусловленные ассоциацией ВИК и вируса лейкемии кошек (ВЛК), характеризуются с быстрым развитием иммунодефицита и клинического заболевания как в природе, так и в эксперименте. Однако одновременная ВИК и ВЛК-инфекция возникает редко, потому что кошки заражаются ВЛК в молодом возрасте, в то время как ВИК-инфекция более распространена среди более старших кошек.
- Не обнаружено связи между ВИК-инфекцией и присутствием коронавирусов или присутствием симптомов инфекционного перитонита у ВИК-инфицированных кошек.
ДИАГНОСТИКА
Определение титров антител
ВИК выделен у большинства кошек с выявленными титрами антител, поэтому определение титров антител является методом, наиболее часто используемым в диагностике ВИК-инфекции. Некоторые иммуно-концентрационные наборы и наборы ЭЛАЙЗА позволяют определять антитела, реагирующие с участком р24-антигена ВИК. Такие тесты особенно необходимы в практической лаборатории, особенно наборы, позволяющие производить одновременно исследование на ВИК-антитела и ВЛК-антигены в одном анализе.
Большинство анализов с помощью ЭЛАЙЗА часто дают ложноположительные результаты, поэтому большие диагностические лаборатории часто используют дополнительно иммунотесты для подтверждения диагноза. Часто используют иммуноблоты или Вестернблоты, но эти приемы достаточно сложны. Однако даже при использовании иммуноблотов возникают определенные трудности в интерпретации результатов пограничных реакций. Некоторые лаборатории используют флюоресцентный анализ, который также является достаточно специфичным. Наборы ЭЛАЙЗА для определения титров антител к вирусной оболочке антигена, также используются в некоторых лабораториях. Другие методики, такие как радиоиммунный анализ или реакция нейтрализации на вирусных частицах, чаще используются в исследовательских лабораториях, чем в диагностических.
Интерпретация ВИК-серологии
- Все серологические методы иногда могут давать явные ложноотрицательные результаты у ВИК-инфицированных кошек, а ЭЛАЙЗА иногда дает ложноположительные результаты.
- Хотя большинство кошек продуцирует антитела в течение нескольких недель после заражения ВИК, некоторые кошки могут оставаться серонегативными в течение года.
- В дальнейшем у некоторых серьезно больных кошек наблюдаются пониженные или неопределяемые титры антител, подобные явления иногда наблюдаются на последней стадии СПИДа у людей и могут быть результатом связывания всех антител вирусными антигенами или глубокой иммуносупрессией.
- Определение титров антител следует производить очень тщательно, имея в виду клиническое значение этого анализа.
- Определение титров антител у клинически здоровых кошек не имеет значения для прогноза заболевания, потому что, во-первых, инкубационный период может продолжаться несколько лет, и, во-вторых, некоторые кошки могут так и не проявить клинических симптомов заболевания. Многие исследователи считают, что у большинства кошек заболевание может прогрессировать до СПИД.
- Обнаружение у больной кошки вируса и антител к ВИК могут не иметь отношения к текущему заболеванию
Выделение вируса
Выделение вируса — достаточно дорогой и требующий затрат времени анализ, а так как большинство кошек с титрами антител одновременно и виремичны, то лабораторная диагностика инфекции в основном заключается в определении титров антител. Но иногда выделение вируса необходимо, особенно в случае свежеинфицированных кошек или кошек на терминальной стадии заболевания с неопределяемыми титрами антител.
У кошки берут один или несколько миллилитров крови, которые сразу помещают в культуры клеток или на транспортные среды. Лимфоциты и моноциты отделяют центрифугированием, а затем инкубируют в культурных средах с активатором митоза Т-клеток кошачьих, конкавалином А (конА) для стимуляции деления лимфоцитов. Через 2-3 дня клетки очищают и ресуспендируют в культурных средах, как было описано выше, но без конА, а с добавлением интерлейкина-2. Свежие, стимулированные, неинфицированные лимфоциты и среды добавляют каждые 10 дней, а культуру проверяют на наличие ВИК раз в неделю в течение 6 или более недель путем поиска цитопатических эффектов, электронной микроскопией, анализами на наличие обратной транскриптазы или продукции вирусных антигенов.
Другие методы, такие как полимеразная цепная реакция или тесты ЭЛАЙЗА на антигены, обычно используют в исследовательских лабораториях, а не в диагностических.
Другие лабораторные исследования
Другими лабораторными признаками подтверждения ВИК-обусловленных заболеваний являются:
- Персистирующая лейкопения, особенно лимфопения и нейтропения.
- Анемия.
- Гипергаммаглобулинемия.
Биопсия лимфоузлов может выявить фолликулярную дисплазию или атрофию и дегенерацию.
Подсчет циркулирующих клеток CD4 и соотношения CD4 / CD8 более перспективен для диагностики иммуносупрессии, хотя результаты даже этих методов трудно сопоставить с клиническими проявлениями иммунодефицита.
- Патогенез ВИК еще до конца не понят.
- Вирус выделяется из крови, лимфоидных органов, слюны и спи-номозговой жидкости и может расти in vitro в лимфоцитах, макрофагах и астроцитах.
- Некоторые штаммы ВИК могут расти на клеточных культурах других тканей, например, в монослое фибробластов.
- Кошек можно экспериментально инфицировать путем подкожной, внутримышечной, интраперитонеальной или внутривенной инъекции.
- После экспериментальной инокуляции котят высокой дозой ВИК вирус выделен из лимфоцитов через 1 неделю, а титры антител присутствуют уже через 3 недели, но развитие виремии и сероконверсия занимают намного больше времени, особенно при малых заразительных дозах вируса.
- Лимфаденопатия обычно наблюдается через 4-5 недель после экспериментального заражения, но ее тяжесть зависит от заразительной дозы и штамма вируса, а также от возраста кошки, которой была произведена инокуляция.
- Острая лимфаденопатия может сопровождаться легкой лихорадкой и лейкопенией, включая лимфопению и нейтропению.
- Лимфаденопатия обычно проходит через 2-3 месяца.
- После этого кошки остаются клинически здоровыми в течение нескольких лет. Тяжелые хронические заболевания, наблюдаемые в естественных условиях, невозможно полностью воспроизвести экспериментально. Считают, что асимптоматическое течение инфекции может длиться по крайней мере 3-5 лет.
- Еще не выяснен пусковой механизм начала терминальной стадии СПИД-подобных заболеваний у кошек.
Дефицит некоторых компонентов иммунного ответа проявляется в течение нескольких месяцев после инфицирования, а затем постепенно развиваются более серьезные иммунные нарушения.
- Снижение количества циркулирующих CD4-клеток и соотношения CD4/CDS.
- Снижение in vitro пролиферации в ответ на некоторые митогены и реакция in vivo на некоторые антигены, можно наблюдать первые 10 месяцев после заражения.
- ВИК в ряде случаев вызывает снижение экспрессии CD4-антигена и синцитиальных формаций в культурах CD4-клеток.
- Персистирующая инфекция вызывает прогрессирующее снижение экспрессии главного комплеса гистосовместимости (ГКГС) антигена типа II.
Теории о развитии СПИДа у кошек:
- СПИД-подобное заболевание развивается, когда количество функциональных СD4-клеток падает ниже критического уровня из-за нарастающих поражений.
- Нарушение развития СD4-клеток вызывает инфекция в макрофагах и других клетках, где присутствуют антигены.
- Вирус постоянно мутирует, чтобы избежать иммунного ответа организма кошки, а СПИД начинается, когда он полностью его преодолеет.
- ВИК-инфекция может вызывать аутоиммунные реакции против компонентов иммунной системы кошки.
- Вторичные инфекции могут манифестировать СПИД, вызывая легкую иммуносупрессию или же посредством стимуляции размножения лимфоцитов и активации макрофагов и, таким образом, усиливая реп-ликацию ВИК в этих клетках.
- Некоторые патогенные агенты, например, герпесвирус-1, могут прямо усиливать репликацию ВИК.
Считается, что неврологические проявления вызываются прямой репликацией ВИК в ЦНС.
ЛЕЧЕНИЕ
Лечение основано на профилактике вторичных инфекций и снижении тяжести клинических симптомов.
- Для контроля вторичных и сопутствующих бактериальных инфекций часто используют антибиотики.
- Хирургическое вмешательство может временно исключить хронические стоматит и гингивит у некоторых кошек.
- Кортикостероиды и мегэстрола ацетат могут временно смягчить клинические симптомы, но они малоэффективны.
Противовирусная терапия
Некоторые лекарства, разработанные для лечения ВИЧ, также подавляют ВИК в клеточных культурах, а для 9-(2-фосфонометоксиэтил)аденина (ФМЭА) и 3'-азидо-3'деокситимидина (АЗТ, зидовудин) показана некоторые клиническая эффективность у кошек. При экспериментальных исследованиях отмечено, что ФМЕА подавлял явную ВИК-инфекцию, если давался перед заражением, хотя как только лечение прекращалось, то развивалась виремия. Из подобных экспериментов явствует, что высокие дозы АЗТ замедляют, но не предотвращают развитие явной ВИК-инфекции. Некоторые исследователи считают, что в некоторых случаях ФМЕА и АЗТ могут способствовать полному клиническому выздоровлению в естественных условиях (но без элиминации вирусной инфекции). Исходя из нашего опыта лечения, использование АЗТ в основном разочаровывает, хотя несколько кошек показали временное клиническое улучшение в течение нескольких недель лечения. АЗТ может давать тяжелые побочные эффекты у кошек, включая анемию и нарушение работы печени, особенно при длительном назначении в высоких дозах.
ПРОФИЛАКТИКА И КОНТРОЛЬ РАСПРОСТРАНЕНИЯ ИНФЕКЦИИ
Вакцины против ВИК еще нет, поэтому основной контроль распространения инфекции заключается в исключении прямых контактов кошек.
- Для домашних кошек индивидуального содержания или для малых групп наилучшим, но не самым легким путем снижения риска заражения является исключение бродяжничества и драк.
- Нет свидетельств, что кастрация снижает риск заражения котов.
- Если известно, что новая кошка или уже живущие в доме кошки инфицированы ВИК, не стоит брать новое животное, если это может привести к дракам и повысить риск распространения инфекции.
- Однако в стабильных кошачьих сообществах, где драки случаются редко, риск заражения неинфицированных кошек от инфицированной очень мал.
- Не существует никаких причин убивать кошку только за то, что она инфицирована ВИК, но предотвращение бродяжничества будет моральным долгом ее владельца.
- Питомникам разведения породистых кошек необходимо избегать приема новых животных без серологического обследования и карантина.
- Если в колонии содержатся кошки серопозитивные к ВИК, лучше их отделить или вообще удалить из питомника. Хотя явная передача инфекции от кошки-матери к котятам случается очень редко, инфицированных кошек лучше исключить из размножения.
В питомниках для передержки или в кошачьих приютах, новые кошки должны содержаться в отдельных отсеках во избежание драк.
Инфекция не передается через предметы или пищевую посуду, а если выполняются все рекомендации по профилактике распространения респираторных заболеваний, то нет риска передачи ВИК-инфекции. Если в приютах бездомных животных кошки содержаться вместе, то новых животных необходимо содержать в карантине около 12 недель, а затем перед помещением их к другим ВИК-отрицательным кошкам необходимо проверить у них титры антител к ВИК.
6 ПОКСВИРУС (КОРОВЬЯ ОСПА) КОШЕК
Поксвирус является членом рода ортопоксвирусов (Ortopoxvirus) семейства Poxviridae (оспенных вирусов). Другими ортопоксвирусами являются малый поксвирус, ныне исчезнувший, вакцинный вирус (вакциния), вирус инфекционной эктромелии мышей, вирус оспы обезьян, вирус оспы верблюдов, поксвирус енотов и поксвирус калифорнийских полевок.
Все ортопоксвирусы близкородственны и очень похожи антигенно. Однако каждый из них отличается комбинацией биологических признаков, незначительными серологическими особенностями или структурой генома.
Не следует смешивать ортопоксвирусы с парапоксвирусами, такими как псевдопоксвирус (псевдооспа коров) и орфвирус. Хотя оба рода вирусов являются членами семейства Poxviridae, каждый из них имеет свою структурную морфологию и между ними не существует иммунной взаимосвязи.
ЭПИЗООТОЛОГИЯ
Поксвирус найден только в Евразии. Большинство сообщений о нахождении поксвируса где-либо еще в мире относится к вирусу вакцинии, который распространился после вакцинации людей и иногда выделяется в отдельный вид.
Поксвирус имеет очень широкий спектр хозяев, включая крупный рогатый скот, людей, домашних кошек и различных животных в зоопарках. Однако основным резервуаром инфекции являются дикие грызуны. Антитела к поксвирусу были найдены у диких полевок и .лесных мышей в Западной Европе, также вирус был выделен у грызунов в Восточной Европе и Евразии.
Поксвирус сравнительно редко вызывает коровью оспу (в отличие от псевдопоксвируса, который может вызывать энзоотическую инфекцию по всему миру). Поксвирус вызывает повреждения сосков и может быстро распространяться через доильное оборудование. Может происходить передача вируса от коровы к человеку, но большинство людей, заболевших оспой коров, не контактировали со скотом.
Наиболее широко распространенным хозяином поксвируса являются домашние кошки. В Великобритании причиной примерно половины заболеваний, обусловленных поксвирусом, являются контакты человека с инфицированными кошками.
- Возможно, что кошки заражаются во время охоты.
- Большинство пораженных кошек — взрослые животные из сельской местности, хозяева которых постоянно охотятся на мелких млекопитающих.
- Большинство случаев заболевания кошек оспой наблюдается осенью, возможно, потому что популяции мелких млекопитающих достигают в этот период своей максимальной численности, а отдельные особи становятся особенно активными, благодаря чему и становятся легкой добычей в этот период.
- Возможна передача от кошки к кошке, но этот вид контакта вызывает асимптоматическую инфекцию у заразившейся кошки.
В европейских зоопарках поксвирус также выделен и у других представителей семейства кошачьих — у гепардов, львов, пум, оцелотов и рысей, а также у окапи, слонов, носорогов и муравьедов.
КЛИНИЧЕСКИЕ СИМПТОМЫ
- Чаще всего внимание ветеринара сначала привлекают обширные поражения кожи.
- При дальнейшем осмотре выясняется, что изначально кошка имела только один очаг поражения — на голове, шее или передних конечностях. Эти первичные нарушения варьируют по объему от массивных абсцессов или участков целлюлита до маленьких струпных папул и язвочек, похожих на укусы грызунов. Однако многие владельцы описывают первичное поражение кожи как маленькие кусаные раны.
- Вторичные, обширные кожные поражения развиваются в период от нескольких дней до нескольких недель (в среднем 10 дней) после появления первого заметного поражения. Вначале они проявляются в виде маленьких, хаотически расположенных, эритематозных узелков, которые через 3-5 дней развиваются в язвенные папулы диаметром больше 1 см. Затем они быстро покрываются струпьями.
- Эти папулы часто не вызывают зуда, но зуд может возникнуть при вторичной инфекции или после заживления.
- Струпья высыхают и отделяются через 2-3 недели. Затем на месте ран вырастают новые волосы, и кошка полностью выздоравливает через 6-8 недель.
- Примерно у одной из пяти кошек отмечают легкие выделения из носа, конъюнктивиты или кратковременный понос, у некоторых кошек может наблюдаться депрессия или анорексия.
- Более тяжелые и хронические системные симптомы или замедленное заживление кожных повреждений могут быть результатом вторичных бактериальных инфекций, особенно если инфицировано первичное поражение кожи или на фоне иммуносупрессии после лечения кортикостероидами; также задерживать полное выздоровление могут хронические болезни (хроническая почечная недостаточность) или инфекции вирусом лейкемии кошек или вирусом иммунодефицита кошек.
- Тяжелые системные симптомы, особенно пневмония и перенесенные иммуносупрессирующие заболевания влекут очень неблагоприятный прогноз, в таких случаях рекомендуется эутаназия.
Коровья оспа крупных кошек
- Коровья оспа у диких кошек протекает очень тяжело.
- У инфицированных гепардов часто развивается пневмония, и они могут умереть еще до появления поражений кожи.
- Высокая смертность от поксвирусной инфекции отмечается у львов, оцелотов и рысей.
ДИАГНОСТИКА
Клинические симптомы
Опытные ветеринары могут диагностировать оспу у кошек по одним клиническим симптомам. Дифференциальный диагноз проводят с абсцессом после укусов, неоплазиями, эозинофильной гранулемой и ми-лиарной экземой, хотя обширные кожные поражения при оспе очень характерны.
Исследование фиксированного биопсинного материала
Биоптат микроскопически проверяют на присутствие характерных эозинофильных интроцитоплазматических включений поксвирусов. Однако их не всегда легко найти, поэтому для уточнения иногда требуется иммуногистохимическая окраска мазков.
Выделение вируса
Вирус выделяют из сухих нефиксированных струпьев. Их можно посылать по почте без каких-либо транспортных сред. Электронная микроскопия позволяет быстро диагностировать три из четырех случаев, но выделение вируса — более чувствительная проба. Анализ может занять до 10 дней.
Сыворотка крови
Сыворотка может быть проверена на присутствие титров антител с использованием нескольких методов. Иммунофлюоресцентный (ИФ) анализ обычно используется из-за своей чувствительности и быстроты исполнения. В связи с тем, что поксвирус не вызывает у кошек энзоотического заболевания, определение титров антител с большой вероятностью говорит о присутствии инфекции. Однако, используя специфические моноклональные антитела, ИФ-анализ можно модифицировать для выявления только иммуноглобулинов класса IgM, доказывающих присутствие инфекции.
ЛЕЧЕНИЕ И ПРОФИЛАКТИКА
Для оспы не существует какого-либо специального лечения, поэтому применяются антибиотики широкого спектра для контроля вторичных и сопутствующих бактериальных инфекций. Большие поражения кожи необходимо промывать антисептиком, на животное нужно надеть защитный (елизаветинский) воротник во избежание расчесов.
Кортикостероиды не назначают, потому что они могут только ухудшить состояние.
Против оспы кошек нет вакцины, потому что это заболевание не считается настолько распространенным и тяжелым, чтобы ее разрабатывать.
Контроль заболеваемости вакцинным вирусом у крупных кошек
Вакциния плохо развивается у крупных кошек, и у гепардов при анализах не выявляют антител. Контроль за распространением инфекции в зоопарках осуществляют путем быстрой диагностики и изоляции пораженных животных.
ОХРАНА ЗДОРОВЬЯ ЛЮДЕЙ
- Кошки могут стать источником поксвирусной инфекции людей (более половины всех случаев).
- Инфекция у людей в большинстве случаев ограничивается единственными поражениями кожи на руках или лице, но может распространяться и на другие части тела, например, с рук на лицо.
- Обширная инфекция и тяжелое заболевание может развиться у людей с пониженным иммунным ответом и у тех, кто перенес кожное заболевание. Поксвирус у человека может вызывать и более тяжелое течение болезни с симптомами ОРЗ, для лечения которой требуется госпитализация.
- Иногда отмечаются смертельные случаи.
- Вакцинация осповакциной, даже недавняя, может не дать полной защиты против первичной поксвирусной инфекции, хотя может предотвратить развитие более тяжелого заболевания.
Заболевания людей оспой коров редки: в Великобритании наблюдается всего два или три случая в год. Исследователи считают, что при соблюдении правил гигиены передача заболевания от кошек к человеку маловероятна.
Ветеринары и люди, связанные с уходом за инфицированными кошками, должны носить резиновые перчатки и следить, чтобы инфицированный материал не попал в открытые раны или глаза. Маленькие дети и люди старшего возраста, перенесшие кожные заболевания, иммуносупрессивные и ослабленные должны избегать контактов с кошками, пока у тех остаются струпья.
Вирус очень устойчив и может сохраняться в сухой и холодной среде несколько месяцев и даже лет. Однако он очень чувствителен к большинству дезинфектантов, особенно к гипохлориту.
ГУБЧАТАЯ ЭНЦЕФАЛОПАТИЯ КОШЕК
ЭТИОЛОГИЯ
О патогенном агенте, вызывающем ГЭК, известно очень мало. Хотя о природе инфекционного агента, вызывающего губчатую энцефалопатию у других видов животных скрепи (почесуху) у овец, губчатую энцефалопатию крупного рогатого скота, болезни Крейтцфельдта-Якоба и куру у людей) также известно не много.
Теоретически считается, что структура патогенного агента включает либо белок ("прион"), либо комбинацию белков и нуклеиновых кислот ("вирино"). Заразительность скрепи связана с белковыми фибриллами (почесуха, обусловленная фибриллами — ПОФ), в которых невозможно определить относящиеся к почесухе нуклеиновые кислоты. Патогенные агенты, вызывающие губчатую энцефалопатию, крайне устойчивы: они выживают при высокой температуре и ультрафиолетовом излучении, которое обычно разрушает нуклеиновые кислоты. Однако возможно, что белковый компонент каким-то образом способен защищать очень маленький нуклеотидный геном (возможно, РНК), а небольшие частицы защищенного клеточного РНК были найдены в ПОФ. В дополнение можно сказать, что не доказано никаких способных к репликации "жизненных форм", которые бы не содержали нуклеиновых кислот, поэтому очень трудно представить, как белок может передавать такие вариации специфических штаммов (штаммы могут быть типизированы по патогенности в испытаниях на лабораторных мышах), которые проявляют себя как полностью различные штаммы почесухи. С другой стороны, белковые фибриллы, связанные с губчатой энцефалопатией, кодированы генами и найдены в нормальных тканях, а сами фибриллы состоят из белка клеток хозяина (белка Р), который аномально изменяется (модифицированный белок Р) во время инфекции. Одни считают, что этот патогенный агент просто имеет аномальную структуру белка ("приона"), который катализирует (кристаллизует?) аномальную структуру других белков, производимых в ЦНС и других тканях, таким образом оказывая влияние на репликацию.
ПАТОГЕНЕЗ
- Путь инфекции у кошек неизвестен, у других видов животных заражение происходит через проглатывание инфицированной пищи, трансплацентарным путем и посредством кожной инокуляции.
- У кошек наиболее вероятным путем распространения инфекции является оральный, при пропитывании пищи, которая является источником инфекции.
- У кошек также неизвестен ни тот отрезок времени, который проходит между заражением и развитием инфекции, ни в каких тканях, кроме ЦНС, может быть найден патогенный агент. Неизвестны пути передачи инфекции между кошками.
ЭПИЗООТОЛОГИЯ
ГЭК встречается достаточно редко и до сих пор наблюдалась только у кошек в Великобритании или вывезенных из нее. Большинство случаев (более 60) отмечено у домашних кошек, но встречались и заболевания ГЭК у других кошачьих (гепардов, оцелотов и пум) в зоопарках.
Ретроспективные исследования аутопсийных материалов ЦНС показали, что ГЭК относительно новое заболевание кошек. Первые случаи были отмечены в 1990 году, вскоре после вспышки ГЭ крупного рогатого скота.
Домашние кошки, заболевшие губчатой энцефалопатией, ели широкий спектр кормов и объедки со стола, поэтому точно определить источник инфекции чрезвычайно трудно. Некоторые могут считать, что ГЭК может вызывать патогенный агент губчатой энцефалопатии крупного рогатого скота либо подобный ему.
За время написания этой книги не появилось новых данных о результативных попытках заразить кошек мясом коров, больных ГЭ. Однако последние эксперименты на мышах показали, что возбудитель ГЭ крупного рогатого скота отличается от известных штаммов скрепи, но ГЭ крупного рогатого скота и ГЭК неотличимы друг от Друга.
КЛИНИЧЕСКИЕ СИМПТОМЫ
Атаксия и дискоординация. Гиперчувствительность. Гиперметрия. Сильное слюнотечение. Мышечный тремор. Поведенческие изменения.
ДИАГНОСТИКА
Диагноз можно поставить только после аутопсии.
Диагноз ставится на основе характерных результатов гистопатологического исследования головного мозга на вскрытии и наличия фибрилл в тканях ЦНС при электронной микроскопии, а также обнаружения белка Р при окраске с использованием иммунной метки.
ОХРАНА ЗДОРОВЬЯ ЛЮДЕЙ
Степень риска заражения человека при контактах с инфицированной кошкой неизвестна, так же как и идентичность патогенных агентов и их связь с причинами губчатой энцефалопатии у других видов животных. Даже если этот агент опасен для человека, то маловероятно, что живая кошка может быть источником инфекции для человека. Однако при вскрытии пораженных животных нужно соблюдать предельную осторожность.
В Великобритании губчатая энцефалопатия кошек является заболеванием, подлежащим обязательной регистрации.